取10 g氢氧化钠放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂A.
取1 g硫酸铜放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.01 g/mL的硫酸铜溶液(蓝色).瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B.
A、B混合.
碱性条件下，双缩脲h2n-co-nh-co-nh2可以和cu离子作用生成紫色沉淀。
灵敏度差，测定范围窄，样品需要量大，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，因此它常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。 干扰测定的物质包括有：在性质上是氨基酸或肽的缓冲液，如TrIs缓冲液，因为它们产生阳性呈色反应，铜离子也容易被还原，有时出现红色沉淀。
配制：
双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液；双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液。
先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL，振荡均匀（营造碱性环境），再加入1～2滴双缩脲试剂B，振荡均匀。如果待测液里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。
具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫色的络合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
以上内容参考：百度百科-双缩脲试剂
双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液；
双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液.
先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL，振荡均匀（营造碱性环境），再加入1～2滴双缩脲试剂B，振荡均匀。如果待测液里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。
蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫色的络合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
扩展资料
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下Cu2+的与双缩脲试剂发生的紫色反应。
而蛋白质分子中含有很多与双缩脲(H2NOC-NH-CONHH2)结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生紫色反应，可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。
参考资料来源：百度百科-双缩脲试剂
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